顯微鏡的基本構(gòu)造

光學顯微鏡由目鏡，物鏡，粗準焦螺旋，細準焦螺旋，壓片夾，通光孔，遮光器，轉(zhuǎn)換器，反光鏡，載物臺，鏡臂，鏡筒，鏡座，聚光器，光闌組成。

顯微鏡分類

光學顯微鏡

通常皆由光學部分、照明部分和機械部分組成。無疑光學部分是最為關鍵的，它由目鏡和物鏡組成。早于1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。光學顯微鏡的種類很多，主要有明視野顯微鏡(普通光學顯微鏡)、暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡、偏光顯微鏡、微分干涉差顯微鏡、倒置顯微鏡。

電子顯微鏡

電子顯微鏡有與光學顯微鏡相似的基本結(jié)構(gòu)特征，但它有著比光學顯微鏡高得多的對物體的放大及分辨本領，它將電子流作為一種新的光源，使物體成像。自1938年Ruska發(fā)明第一臺透射電子顯微鏡至今，除了透射電鏡本身的性能不斷的提高外，還發(fā)展了其他多種類型的電鏡。如掃描電鏡、分析電鏡、超高壓電鏡等。結(jié)合各種電鏡樣品制備技術，可對樣品進行多方面的結(jié)構(gòu) 或結(jié)構(gòu)與功能關系的深入研究。顯微鏡被用來觀察微小物體的圖像。常用于生物、醫(yī)藥及微小粒子的觀測。電子顯微鏡可把物體放大到200萬倍。臺式顯微鏡,主要是指傳統(tǒng)式的顯微鏡,是純光學放大，其放大倍率較高，成像質(zhì)量較好，但一般體積較大,不便于移動,多應用于實驗室內(nèi),不便外出或現(xiàn)場檢測。

便攜式顯微鏡

便攜式顯微鏡,主要是近幾年發(fā)展出來的數(shù)碼顯微鏡與視頻顯微鏡系列的延伸。和傳統(tǒng)光學放大不同,手持式顯微鏡都是數(shù)碼放大,其一般追求便攜,小巧而精致,便于攜帶;且有的手持式顯微鏡有自己的屏幕,可脫離電腦主機獨立成像,操作方便,還可集成一些數(shù)碼功能,如支持拍照,錄像,或圖像對比,測量等功能。

數(shù)碼液晶顯微鏡，最早是由博宇公司研發(fā)生產(chǎn)的，該顯微鏡保留了光學顯微鏡的清晰，匯集了數(shù)碼顯微鏡的強大拓展、視頻顯微鏡的直觀顯示和便攜式顯微鏡的簡潔方便等優(yōu)點。

掃描隧道顯微鏡

掃描隧道顯微鏡亦稱為“掃描穿隧式顯微鏡”、“隧道掃描顯微鏡”，是一種利用量子理論中的隧道效應探測物質(zhì)表面結(jié)構(gòu)的儀器。它于1981年由格爾德·賓寧(G.Binning)及海因里希·羅雷爾(H.Rohrer)在IBM位于瑞士蘇黎世的蘇黎世實驗室發(fā)明，兩位發(fā)明者因此與恩斯特·魯斯卡分享了1986年諾貝爾物理學獎。

它作為一種掃描探針顯微術工具，掃描隧道顯微鏡可以讓科學家觀察和定位單個原子，它具有比它的同類原子力顯微鏡更加高的分辨率。此外，掃描隧道顯微鏡在低溫下(4K)可以利用探針尖端精確操縱原子，因此它在納米科技既是重要的測量工具又是加工工具。

STM使人類第一次能夠?qū)崟r地觀察單個原子在物質(zhì)表面的排列狀態(tài)和與表面電子行為有關的物化性質(zhì)，在表面科學、材料科學、生命科學等領域的研究中有著重大的意義和廣泛的應用前景，被國際科學界公認為20世紀80年代世界十大科技成就之一。

顯微鏡的使用方法

顯微鏡的使用

利用自然光源鏡檢時，最好用朝北的光源，不宜采用直射陽光;利用人工光源時，宜用日光燈的光源。

鏡檢時身體要正對實習臺，采取端正的姿態(tài)，兩眼自然張開，左眼觀察標本，右眼觀察記錄及繪圖，同時左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動標本視野。右手記錄、繪圖。

鏡檢時載物臺不可傾斜，因為當在五套載物臺傾斜時，液體或油易流出，既損壞了標本，又污染載物臺，也影響檢查結(jié)果。

鏡檢時應將標本按一定方向移動視野，直至整個標本觀察完畢，以便不漏檢，不重復。

顯微鏡的重光為對光，接物鏡的轉(zhuǎn)換及光線的調(diào)節(jié)。觀察寄生蟲標本時，光線調(diào)節(jié)甚為重要。因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等，均為自然光狀態(tài)的物體，有大有小，色澤有深有淺，有的無色透明，而低倍、高倍接物鏡轉(zhuǎn)換較多，故須隨著鏡檢時對不同標本和要求，需要隨時調(diào)節(jié)焦距和光線，這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下，染色標本光線宜強，無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強。

1. 對光

：(1)將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。

(2)撥動反光鏡，調(diào)節(jié)至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面，光源強時用平面，較暗時用凹面，需要強光時，將聚光器提高，光圈放大;需要弱光時，將聚光器降低，或光圈適當縮小。

(3)將待觀察的標本置載物臺上，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器的同時，須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離。

(4)左眼于接目鏡觀察，同時左手轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)，使鏡筒徐徐上升以調(diào)節(jié)焦距，使視野內(nèi)的物象看到上時即停，再調(diào)微調(diào)節(jié)器，至標本清晰為止。

2. 接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié)：

顯微鏡一般具有三個接物鏡，即低倍、高倍及油鏡，固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤孔中。觀察標本時，先使用低倍接物鏡，此時，視野較大，標本較易查出，但放大倍數(shù)較小(一般放大100倍)，較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大(一般放大400倍)，能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。

寄生蟲的蠕蟲卵，微絲蚴，原蟲的滋養(yǎng)體及包囊，昆蟲的幼蟲，均使用低、高倍鏡。組織細胞內(nèi)的原蟲，則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察，如在低倍鏡下不能準確鑒定所見的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時，則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。使用油鏡觀察，一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察。

3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別：

(1)標明放大倍數(shù)10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。

(2)低倍鏡最短，高倍鏡較長，油鏡最長。

(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大，高倍鏡較大，油鏡最小。

(4)油鏡頭上常刻有黑色環(huán)圈，或“油”字。

4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法：

(1)光線對好后，移動推進器尋找需要觀察的標本。

(2)如標本的體積較大，不能清楚查見其構(gòu)造因而不能確認時，則將標本移至視野中央，再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。

(3)旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。

(4)調(diào)節(jié)聚光器及光圈，使視野內(nèi)的物象達到最清晰的程度。

5. 油鏡的使用方法：

(1)原理：使用油鏡觀察時，需加香柏油，因為油鏡需要進入鏡頭的光線多，但油鏡的透氣孔最小，這樣進入的光線就少，物體不易看清楚。同時又因自玻片透過的光線，由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片：n=1.52，空氣：n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光，因此射入鏡頭的光線就更少，物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油，加于標本與玻片之間，使光線不通過空氣，這樣射入鏡頭的光線就較多，物象就看得清楚。

(2)油鏡的使用：

a.將光線調(diào)至最強程度(聚光器提高，光圈全部開放)。

b.轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升，滴香柏油1小滴(不要過多，不要涂開)于接物鏡正下方標本上。

c.轉(zhuǎn)動接物鏡轉(zhuǎn)換盤，使油鏡頭于鏡筒下方。

d.俯身鏡旁側(cè)面在肉眼的觀察下，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內(nèi)，輕輕接觸玻片為止。

e.慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。

f.轉(zhuǎn)動微調(diào)節(jié)器，使視野物象達到最清晰的程度。

g.左手徐徐移動推進器，并轉(zhuǎn)動微調(diào)節(jié)器以觀察標本。

h.標本觀察完畢后，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器將鏡筒升起，取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。

6. 注意事項：

(1)使用顯微鏡之前，應熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法，特別應掌握識別三種接物鏡之特征。

(2)寄生蟲學實習中所觀察的標本，大多數(shù)為無色和顏色較淺，因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。

(3)新鮮標本觀察時，須加蓋玻片，以免標本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡，同時可使標本表面勻平，光線得以集中，有利于觀察。

顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法經(jīng)典例題

將寫有“生物”字樣的臨時玻片標本放在顯微鏡下觀察，正確操作應看到的圖像是

答案 :

D

請根據(jù)下圖回答相關問題.

(1)圖①中，轉(zhuǎn)動[ ]粗準焦螺旋時，鏡筒的升降范圍較大.

(2)臨時裝片的制作主要有擦片、滴液、取材、 蓋片、染色五步，圖②是其中的哪一步驟? ________

(3)制作人體口腔上皮細胞臨時裝片時，需要染色(如圖③)，通常所用的染液是________.

(4)圖④和圖⑤中，哪一幅是觀察班的人體口腔上皮細胞? ________.因為人體口腔上皮細胞沒有________ (寫出一點即可).

(5)圖④中，在顯微鏡下看到的顏色最深的是細胞中的哪一結(jié)構(gòu)? ________

答案 :

(1)6(2)蓋片(3)碘液(4)⑤細胞壁(5)細胞核

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